肝病建模治疗研究中，能够稳定供应的、具备功能特性的人肝细胞是必不可少的。同样，人肝细胞也影响着药物开发，特别是临床前药物的安全性和毒性测试。但由于供体材料有限和个体间差异大等原因，人原代肝细胞的使用受到限制，这也一定程度上导致了新药开发中巨大的失败率和制药工业中大量的时间和金钱损失。

利用诱导多能干细胞（Induced pluripotent stem cells，ipSCs）分化获得肝细胞，可以很好解决人原代肝细胞的问题，因为：人ipS细胞可稳健增殖，只要通过持续分化，就可以实现相同遗传背景肝细胞的稳定供应。不同供体来源的人ipS-肝细胞也可以重现群体代谢表型的多样性。

原发性高草酸尿症1型（primary hyperoxaluria type 1，pH1）是一种罕见的常染色体隐性 遗传�。怯晒趸锩柑迕副彼�-乙醛酸转氨酶(alanine-glyoxylate aminotransferase，AGT)功能缺陷引起的肝脏代谢疾病。AGT功能缺陷导致了草酸盐的过量产生，而草酸盐又与钙复合物在尿路中形成不溶性草酸钙盐，最终导致终末期肾病。目前主流的治疗方法是肝肾联合移植，其局限性在于供体器官短缺和终生需要免疫抑制。于是，基因治疗成为新的希望，即移植“经过基因修饰的，成功恢复AGT功能的”自体肝细胞来治疗pH1。但是，新鲜的原代肝细胞存在器官难获得、无法增殖、功能丧失和免疫排斥风险等限制。那么，患者特异性ipS来源的肝细胞能否承担重任，作为自体pH1肝细胞基因治疗的新选择呢？

以下10min的网络研讨会中，Julie Estève博士为大家回答这个问题？

小结：Julie Estève博士团队以患者特异性ipS来源的肝细胞为模型，对原发性高草酸尿症1型（pH1）基因治疗进行了研究探讨。首先构建了pH1患者背景的人ipS细胞，随后利用慢病毒载体来修复突变，最后通过将其定向分化为肝细胞来评价基因治疗的效果。结果显示，这些经过成功基因修饰的患者特异性ipS细胞，在成功分化为肝细胞后，其RNA和蛋白质水平上均有显著的AGT表达。详细资料数据，大家也可以翻阅文献原篇了解。

J Estève, et al. Generation of induced pluripotent stem cells-derived hepatocyte-like cells for ex vivo gene therapy of primary hyperoxaluria type 1. Stem Cell Research 38(2019):101467.

关于研讨会中被Julie Estève博士点名的两款Takara产品，小编已经自觉帮大家列在下面了，欢迎种草同款单品。创建感兴趣的人ipS来源肝病模型，你可以永远相信Takara！

货号

产品名

规格

说明

Y30010

Cellartis DEF-CS 500 Culture System

1 Kit

人ipS细胞培养系统

Y30055

Cellartis ipS Cell to Hepatocyte Differentiation System

1 Kit

人ipS-肝分化系统

再次重点Cue一下Takara明星产品：人ipS-肝分化系统（Y30055）！

▪可以任何一种感兴趣的人ipS细胞起始，患者特异性或疾病相关性。
▪人ipS细胞-DE细胞-肝细胞逐步分化，仅需3周，纯度高于90%。
▪现成的分化试剂、标准的protocol，新手友好，批量分化成为可能。
▪获得的肝细胞表达成熟的标记物、CYp活性等常规肝细胞功能特性。

为了证实Takara 人ipS-肝分化系统（Y30055）的稳健性和通用性，对不同的人ipS细胞进行了肝分化测试(Laydon, Bangham and Asquith 2015)。16个不同供体来源的、经过Takara分化系统获得的人ipS-肝细胞，(参见下图-A)，与原代肝细胞形态相似，多边形、双核、细胞边界明显; 同时检测证实这16个不同供体来源的人ipS-肝细胞，高表达成熟人肝细胞标记物HNF4α,（参见下图-B），HNF4α阳性率平均值为93.8%。

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